Небольшая каменная однокупольная церковь в стиле классицизма в южной части монастыря. Первоначально построена в 1814 у городского кладбища Задонска при помощи помещика А. Ф. Викулина. В 1863-1865 расширена боковыми Тихоно-Митрофаниевским и Предтеченским приделами. Закрыта в 1930, капитально перестроена, занята конторой. В настоящее время здание обустроено под иноческие кельи, в 2003 выгорожен домовый Живоносовский храм.